Tartu Ülikooli genoomika tuumiklabor pakub arheoloogiliste, ajalooliste ja keskkonnaproovide uurimise jaoks vana DNA eraldamise, sekveneerimisraamatukogude ettevalmistamise, sekveneerimise ning andmeanalüüsi teenuseid. Meie spetsiaalne puhasruumide kompleks võimaldab degradeerunud DNA kontrollitud töötlemist inimese, looma-, taime- ja setteproovidest.
Spetsiaalne vana DNA labor
Vana DNA labori spetsiaalne puhasruumide kompleks loodi 2018. aastal. Labor on kavandatud üksnes tugevalt degradeerunud arheoloogilise ja ajaloolise materjali kontrollitud töötlemiseks. Proovide ettevalmistamiseks, DNA eraldamiseks, sekveneerimisraamatukogude ettevalmistamiseks ja puhastamiseks kasutatakse eraldi positiivse rõhu ja sõltumatu ventilatsioonisüsteemiga loodud ruume.
Rahvusvaheline arheogenoomika teadustöö
Meie teadustöö on ülemaailmne ning hõlmab ajaperioode paleoliitikumist kuni uusajani. Vana DNA laboris saadud andmed on kaasatud rahvusvahelistesse arheogenoomika uuringutesse, mille tulemused on avaldatud juhtivates teadusajakirjades.
Integreeritud labori- ja bioinformaatika tugi
Laborispetsialistid töötavad koostöös teadlastega alates proovide valimisest ja DNA eraldamisest kuni sekveneerimise ja esmase bioinformaatilise analüüsini.
Arheogenoomika
Vana DNA autentsuse ja saastatuse hindamine
Inimese vana DNA uuringud
Loomade vana DNA uuringud
Taimede vana DNA uuringud
Setete vana DNA uuringud
Muistsete patogeenide uurimine
1. Vana DNA eraldamine ja esmane sekveneerimine
Sobib DNA olemasolu ja kvaliteedi hindamiseks ning esmaste analüüside läbiviimiseks vajalike andmete genereerimiseks.
Sisaldab
Luu-, hambakivi- või juukseproovide ettevalmistamist (10 kuni 300 mg)
Dekontamineerimist
DNA eraldamist
Ekstrakti puhastamist (lõppmaht 100 μl)
Kahekordse indeksiga mitte-UDG raamatukogu valmistamist
Raamatukogu kvantifitseerimist
Sekveneerimist Illumina NextSeq 2000 platvormil (u. 20M 100 nt järjestust)
2. Vana DNA eraldamine ja sekveneerimisraamatukogude valmistamine
Sobib projektidele, kus on vaja vana DNA eraldamist ja sekveneerimisraamatukogude ettevalmistamist, kuid mille raames sekveneerimine toimub mujal või erikokkulepete alusel.
Sisaldab
Luu-, hambakivi- või juukseproovide ettevalmistamist (10 kuni 300 mg)
Dekontamineerimist
DNA eraldamist
Ekstrakti puhastamist (lõppmaht 100 μl)
Kahekordse indeksiga mitte-UDG raamatukogu valmistamist
Raamatukogu kvantifitseerimist
3. Inimese vana DNA esmane andmeanalüüs
Sobib projektidele, mille raames ei ole kavas laialdasi analüüse või kui nende läbiviimine toimub koostöö raames ning sõltub esmastest analüüsitulemustest.
Sisaldab
Proovi säilivuse ja autentsuse hindamine
Geneetilise soo määramine
Mitokondriaalse DNA haplogrupi määramine
Y-kromosoomi haplogrupi määramine
Sugulusastme hindamine
Analüüside kättesaadavus sõltub sekveneerimiskatvusest ja andmete kvaliteedist.
Vana DNA labor hõlmab spetsiaalseid puurimis- ja eraldamisruume, puhastus- ja raamatukogude ettevalmistamise ruume ning eraldi reagentide ettevalmistamise ruumi. Puhasruumides on positiivse rõhk ja sõltumatu ventilatsioonisüsteem. Laboris toimuvat puudutav info on integreeritud proovijälgimise andmebaasi.
Raamatukogude amplifitseerimine ja puhastamine toimub spetsiaalsetes laboriruumides, mis on füüsiliselt eraldatud DNA eraldamise aladest. Sekveneerimine viiakse läbi genoomika tuumiklabori sekveneerimisplatvormidel.
Vastavalt projekti vajadustele pakume alternatiivseid raamatukogude valmistamise protokolle, sealhulgas osalist UDG ja täielikku UDG töötlust. Soovi korral on võimalik kasutada ka kohandatud sekveneerimisstrateegiaid, sekveneerimissügavusi ja lugemimahtusid.
Meie meeskond aitab hinnata proovide sobivust, soovitada uuringu eesmärkidele vastavaid töövooge ning koostada optimaalse sekveneerimisstrateegia teie teadusprojekti jaoks.